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数字PCR在HBV-DNA中的应用

点击次数:402 发布时间:2021-09-23

Droplet数字PCR是一种新兴的高灵敏度核酸定量方法,正越来越多地应用于临床病毒学领域,包括乙型肝炎病毒(HBV)的检测。在此,我们综合报道了一种可靠的、重复性好的ddPCR方法,用于血清HBV-DNA的高灵敏定量。概率分析检测限为4拷贝/ml(<1IU/ml),线性关系良好(R2=0.94),批内、批间重复性好,同一批和两批独立批之间的差值分别不超过0.14logCopies/mL和0.21logCopies/mL。通过分析慢性HBV感染患者(大多数正在接受抗病毒治疗)的血清样本,ddPCR成功地定量了89.8%的血清HBV-DNA<20IU/mL[相当于<112拷贝/ml]的血清HBV-DNA,中位数(IQR)为8(5-14)IU/mL[45(28-78)拷贝/ml],在66.7%的血清HBV-DNA检测不到的患者中,中位数(IQR)为5.01IU/mL(相当于<112copy/ml),其中99.8%的患者血清HBV-DNA可检测到<20IU/mL[相当于<112拷贝/ml],中位数(IQR)为8(5-14)IU/mL[45(28-78)拷贝/ml]。同样,通过分析血清学特征与隐匿性HBV感染相适应的患者(抗HBc+/HBsAg-)的血清样本,ddPCR成功地定量了40%患者的血清HBV-DNA,中位数(IQR)为1(1-2)IU/mL[5(5-11)拷贝/ml],这与隐匿性HBV感染中通常观察到的极其有限的病毒复制一致。总体而言,血清HBV-DNA高灵敏定量检测的可用性可以为优化隐匿性乙型肝炎感染的诊断、改善慢性HBV感染患者的治疗管理提供附加值,也可以根据旨在实现HBV功能性治愈的创新药物(即将投入临床实践)提供附加值。



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