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数字PCR定量检测HBVcccDNA

点击次数:470 发布时间:2021-09-28

背景与目的:隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的准确诊断需要HBsAg阴性者肝活检组织中HBVDNA的证实。然而,在临床实践中,潜伏的OBI是通过发现抗Hb核心抗原的抗体(抗HBc)而推断出来的。我们调查了抗HBc阳性受试者中OBI的真实患病率和肝内HBV的分子特征。

方法:对100例标准血清学抗-HBc阳性的移植供者(平均年龄68.2岁;男64例,女36例),用巢式PCR检测总HBVDNA,用数字PCR检测HBVcccDNA(线性:R2=0.9998;定量和检测下限分别为2.4和0.8拷贝/105细胞)。

结果:52%(52/100)的受试者存在真实的OBI状态,52%(27/52)的OBI阳性者存在cccDNA,中位数为13拷贝/105细胞(95%可信区间5-25)。采用IgG型抗HBc特异性检测,HBVcccDNA阳性献血者的中位抗体水平显著高于阴性献血者

(5.7 [3.6-9.7] vs. 17.0 [7.0-39.2] COI, p=0.007)。经多因素分析,抗-HBc IgG值>4.4cccDNA与肝内HBVcccDNA的发现相关(OR=8.516,p=0.009),低于该值则排除其存在,阴性预测值为94.6%。

结论:采用一种新的基于ddPCR的内部检测方法,在大约一半的OBI病例中,肝内HBV cccDNA可被定量检测到。抗HBc IgG滴度可能是预测免疫抑制患者OBI再激活风险的有用指标。



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