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如何规范的保养和维修微滴式数字PCR仪?

点击次数:203 发布时间:2022-04-26
  微滴式数字PCR仪是一种核酸分子一致定量技术。目前有三种方法用于核酸分子的定量,普通PCR半定量通过灰度进行定量;荧光定量PCR通过Ct(Cq)值进行相对定量;数字PCR是较新的定量技术,基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量,是一种一致定量的方法。主要采用微滴化方法,将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中,每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。这样经过PCR循环之后,有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号,没有模板的反应器就没有荧光信号。根据数字PCR反应单元总数和有荧光信号的单元数以及样品的稀释倍系数,就可以得到样本的最初拷贝数(浓度)。
 
  微滴式数字PCR仪的保养:
  1、样品池的清洗:先打开盖子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液体,用棉签吸干剩余液体;打开PCR仪,设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行,让残余液体挥发去除。一般5~10min即可。
  2、热盖的清洗:对于数字PCR仪,当有污染出现,而且这一污染并非来自样品池时;或当有污染或残迹物影响到热盖的松紧时,需要用压缩空气或纯水清洗垫盖底面,确保样品池的孔镜干净,无污物阻挡光路。
  3、仪器外表面的清洗:清洗仪器的外表面可以除去灰尘和油脂,但达不到消毒的效果。选择没有腐蚀性的清洗剂对PCR仪的外表面进行清洗。
  4、更换保险丝:先将PCR仪关机,拔去插头,打开电源插口旁边的保险盒,换上备用的保险丝,观察是否恢复正常。
 
  维修:
  1、PCR仪器需要定期检测,视制冷方式而定一般半年至少一次。
  2、PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的,当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1~2℃时,可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。
  3、PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制,要求越短越好,当PCR仪的降温过程超过60s,就应该检查仪器的制冷系统,对风冷制冷的PCR仪要较彻底地清理反应底座的灰尘;对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。
  4、一般情况如能采用温度修正法纠正仪器的温度时,不要轻易打开或调整数字PCR仪的电子控制部件,必要时要请专业人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。

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